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ELISA檢測試劑盒,人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA檢測試劑盒

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産品型號:
HMGB-1
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産品特點:
人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA试剂盒应用双抗體夹心法测定标本中人高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)水平。用纯化的人迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被单抗的微孔中依次加高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1),再与 HRP 标记的高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)抗體结合形成抗體-抗原-酶标抗體复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在
  HMGB-1ELISA檢測試劑盒,人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA檢測試劑盒的詳細資料:


人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA檢測試劑盒實驗原理 
本试剂盒应用双抗體夹心法测定标本中人高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)水平。用纯化的人迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被单抗的微孔中依次加高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1),再与 HRP 标记的高迁移率族蛋白 B1(HMGB-1)抗體结合形成抗體-抗原-酶标抗體复合物,经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色。TMB 在HRP 酶的催化轉化成藍色,並在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顔色的深淺和樣品中的高遷移率族蛋白B(HMGB-1)呈正相关。用酶标仪在 450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算品中人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)濃度。 

試劑盒組成 

1 30 倍浓缩洗涤液 20ml×1 瓶 7 终止液 6ml×1瓶 

2 酶标试剂 6ml×1 瓶 8 標准品(320µg/L) 0.5ml×1 瓶 

3 酶标包被板 12孔×8 条 9 標准品稀释液 1.5ml×1 瓶 
4 样品稀释液 6ml×1 瓶 10 说明书 1份 
5 显色剂A 液 6ml×1 瓶 11 封板膜 2张 
6 显色剂B液 6ml×1/瓶 12 密封袋 1个 
標本要求 
1.標本采集後盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取後應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反複凍融 

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。 

人高遷移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA檢測劑盒操作步驟 
1. 標准品的稀释:本试剂盒提供原倍標准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。 

160µg/L 5号標准品 150µl的原倍標准品加入150µl標准品稀释液 
80µg/L 4号標准品 150µl的5号標准品加入150µl標准品稀释液 
40µg/L 3号標准品 150µl的4号標准品加入150µl標准品稀释液 
20µg/L 2号標准品 150µl的3号標准品加入150µl標准品稀释液 
10µg/L 1号標准品 150µl的2号標准品加入150µl標准品稀释液 
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標准品准確加樣50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40µl,然後再加待測樣品10µl(樣品zui終稀釋度爲5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。 

3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30 分钟。 
4. 配液:将30 倍浓缩洗涤液用蒸馏水30 倍稀释后备用 
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置 30 秒后弃去,如此重複5次,拍幹。 

6. 加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。 
7. 温育:操作同3。 
8. 洗涤:操作同5。 
9. 显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分

鍾. 
10. 终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 
11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD 值)。 测定应在加终止液後15分鍾以內進行。 

計算 
以标准物的浓度为横坐标,OD 值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD 值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD 值计算出标准曲线的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即爲樣品的實際濃度。 

人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA檢測試劑盒注意事項 
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡 15-30 分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。 

2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。 
3.各步加樣均應使用加樣器,並經常校對其准確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鍾內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。 

4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD 值大于標准品孔*孔的OD 值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请zui後乘以總稀釋倍數(×n×5)。 

5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 
6.底物請避光保存。 
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數爲准. 
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。 
9.本試劑不同批號組分不得混用。 
人高迁移率族蛋白B1(HMGB-1)ELISA檢測試劑盒保存條件及有效期 
1.試劑盒保存:;2-8℃。 
2.有效期:6個月

産品相關關鍵字: 人ELISA檢測試劑盒 HMGB-1 ELISA檢測試劑盒
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